• 00:00 1.
    MTT
  • Index
  • Notes
  • Comment
  • Fullscreen
MTT assay操作步驟
Duration: 05:54, Browse: 20684, Last Updated: 2019-01-07
Keypoint
  1. 1.
    種細胞+transfection
    1. 96 well拿四盤,分別是DAY0, DAY 1, DAY 2, DAY3要測的
    2. transfect好的細胞打起來計數,於96 well中種3000-5000顆細胞/well/100ul,一組可做3重複以上避免細胞有種不準的
  2. 2.
    種細胞注意事項
    96 well的邊邊不要種因為測吸光值較不準,種細胞時vortex均勻,種完要搖晃細胞比較會均勻分散
  3. 3.
    測吸光值
    1. 細胞貼附後(6-8h)overnightDAY0,將medium吸掉後加入MTT混合medium(比例1:9要避光)總體積100ul,其他盤換一般medium
    2. MTT的那盤避光incubate 1-3h後吸掉medium加入100ul DMSO(可在外面bench)shaker5mins(也可不搖)後測吸光值570nm
    3. 24h後測DAY1,以此類推
  4. 4.
    加MTT注意事項
    DAY0時,將medium吸掉後加入MTT混合medium(比例1:9要避光)總體積100ul,其他盤要換一般medium加100ul
  5. 5.
    測吸光值注意事項
    注意Formazan結晶是否確實溶解,若結晶較多須至shaker搖晃至溶解
    Location
    Folder name
    MTT assay (薏陵)
    Author
    陳姳蓁(游薏陵)
    Branch
    賴亮全教授
    Created
    2019-01-07 00:50:53
    Last Updated
    2019-01-07 14:44:27
    Duration
    05:54