20190114專題報告-clone製作初級版108年

Index

00:22 1.
Slide 0
00:58 2.
 Clone的由來
01:42 3.
clone本身運作所需的(backbone)
04:51 4.
 MCS的原理
02:09 5.
clone本身運作所需的(backbone)
00:50 6.
 MCS的原理
00:08 7.
-單切與雙切
00:57 8.
 MCS的原理
00:03 9.
-單切與雙切
02:09 10.
 MCS的原理
03:04 11.
-單切與雙切
00:20 12.
 MCS的原理
01:45 13.
-單切與雙切
00:02 14.
-限制酶辨認序列特性
00:03 15.
-單切與雙切
04:55 16.
-限制酶辨認序列特性
00:09 17.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
02:01 18.
-限制酶辨認序列特性
12:47 19.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:01 20.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:43 21.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
03:50 22.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
01:56 23.
 primer的設計
00:01 24.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:10 25.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 26.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
02:19 27.
 primer的設計
01:35 28.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
00:00 29.
 primer的設計
00:00 30.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:00 31.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 32.
-限制酶辨認序列特性
00:00 33.
-單切與雙切
00:00 34.
 MCS的原理
00:14 35.
clone本身運作所需的(backbone)
00:00 36.
 MCS的原理
00:00 37.
-單切與雙切
00:00 38.
-限制酶辨認序列特性
00:00 39.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 40.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:01 41.
 primer的設計
00:02 42.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
00:07 43.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
02:27 44.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
01:37 45.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
00:00 46.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
00:02 47.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
00:00 48.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
00:02 49.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
01:43 50.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
04:40 51.
 質體的轉殖-轉殖控制組
01:56 52.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
00:01 53.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:44 54.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
00:01 55.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:37 56.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
01:09 57.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:02 58.
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Professor：aspirin

Date：2019-01-14

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 Clone的由來
01:42 3.
clone本身運作所需的(backbone)
04:51 4.
 MCS的原理
02:09 5.
clone本身運作所需的(backbone)
00:50 6.
 MCS的原理
00:08 7.
-單切與雙切
00:57 8.
 MCS的原理
00:03 9.
-單切與雙切
02:09 10.
 MCS的原理
03:04 11.
-單切與雙切
00:20 12.
 MCS的原理
01:45 13.
-單切與雙切
00:02 14.
-限制酶辨認序列特性
00:03 15.
-單切與雙切
04:55 16.
-限制酶辨認序列特性
00:09 17.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
02:01 18.
-限制酶辨認序列特性
12:47 19.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:01 20.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:43 21.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
03:50 22.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
01:56 23.
 primer的設計
00:01 24.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:10 25.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 26.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
02:19 27.
 primer的設計
01:35 28.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
00:00 29.
 primer的設計
00:00 30.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:00 31.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 32.
-限制酶辨認序列特性
00:00 33.
-單切與雙切
00:00 34.
 MCS的原理
00:14 35.
clone本身運作所需的(backbone)
00:00 36.
 MCS的原理
00:00 37.
-單切與雙切
00:00 38.
-限制酶辨認序列特性
00:00 39.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 40.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:01 41.
 primer的設計
00:02 42.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
00:07 43.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
02:27 44.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
01:37 45.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
00:00 46.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
00:02 47.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
00:00 48.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
00:02 49.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
01:43 50.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
04:40 51.
 質體的轉殖-轉殖控制組
01:56 52.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
00:01 53.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:44 54.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
00:01 55.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:37 56.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
01:09 57.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
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 Clone的由來
01:42 3.
clone本身運作所需的(backbone)
04:51 4.
 MCS的原理
02:09 5.
clone本身運作所需的(backbone)
00:50 6.
 MCS的原理
00:08 7.
-單切與雙切
00:57 8.
 MCS的原理
00:03 9.
-單切與雙切
02:09 10.
 MCS的原理
03:04 11.
-單切與雙切
00:20 12.
 MCS的原理
01:45 13.
-單切與雙切
00:02 14.
-限制酶辨認序列特性
00:03 15.
-單切與雙切
04:55 16.
-限制酶辨認序列特性
00:09 17.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
02:01 18.
-限制酶辨認序列特性
12:47 19.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:01 20.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:43 21.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
03:50 22.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
01:56 23.
 primer的設計
00:01 24.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:10 25.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 26.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
02:19 27.
 primer的設計
01:35 28.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
00:00 29.
 primer的設計
00:00 30.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:00 31.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 32.
-限制酶辨認序列特性
00:00 33.
-單切與雙切
00:00 34.
 MCS的原理
00:14 35.
clone本身運作所需的(backbone)
00:00 36.
 MCS的原理
00:00 37.
-單切與雙切
00:00 38.
-限制酶辨認序列特性
00:00 39.
-左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
00:00 40.
-目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
00:01 41.
 primer的設計
00:02 42.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
00:07 43.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
02:27 44.
-insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
01:37 45.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
00:00 46.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
00:02 47.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
00:00 48.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
00:02 49.
-微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
01:43 50.
Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
04:40 51.
 質體的轉殖-轉殖控制組
01:56 52.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
00:01 53.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:44 54.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
00:01 55.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:37 56.
-QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
01:09 57.
-抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
00:02 58.
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Location

Folder name

Clone製作 (品豪)

Author

賴亮全

Branch

賴亮全教授

Created

2019-01-23 14:27:04

Last Updated

2019-01-23 14:27:04

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Duration

1:05:44