Media:
39
Create:
2019/06/13
Manager:
陳逸安
  1. Media Center
  2. Overview
  3. 公用實驗指南 (Experimental Protocol)
  4. 公用實驗指南 (Experimental Protocol)
  5. FAQ
Manager：陳逸安
  1. 1.
    Cell culture
  2. 2.
    RNA extraction
  3. 3.
    Transform
  4. 4.
    qPCR
  5. 5.
    Western blot
  6. 6.
    MTT assay
  7. 7.
    Wound Healing assay
  8. 8.
    Luciferase reporter assay
  9. 9.
    primer設計
  10. 10.
    其他
  1. 1.
    Cell culture
      1. Q1.
        挑到雜菌的困擾?
      2. Q2.
        什麼是Trypsin？
      3. Q3.
        什麼是 Trypan blue？
      4. Q4.
        開血清管或離心管的蓋子時發現paraffin容易殘留、撕不完全，怎麼辦？
      5. Q5.
        細胞容易漂或長得慢怎麼辦?
      6. Q6.
        顯微鏡下看起來沒有長其他的東西、medium也沒有變色，就代表細胞沒有汙染嗎？
      7. Q7.
        若cell有Mycoplasma汙染，該怎麼辦？
      8. Q8.
        Mycoplasma汙染會影響什麼？
      9. Q9.
        Mycoplasma的污染來源是？
      10. Q10.
        不同cell line的生長速度和所需的medium內容物和比例會不同嗎？
      11. Q11.
        種細胞時可否不要配mix液體？分開算每一格需要多少細胞液，加完後再補medium
    1. 2.
      RNA extraction
        1. Q12.
          各步驟的目的是什麼？
        2. Q13.
          為何我們實驗室是使用NucleoZOL而非TRIzol？
        3. Q14.
          如何確認真的有抽到完整的RNA？ 除了紫外光分光光度計(OD值:260nm,280nm.230nm)以外的方法
      1. 3.
        Transform
          1. Q15.
            什麼是Lysogeny broth (LB)？
          2. Q16.
            抽Mini、Midi和Maxi的差別是？
        1. 4.
          qPCR
            1. Q17.
              CT值的意義
            2. Q18.
              SYBR Green 用途
            3. Q19.
              Melting Curve的意義
            4. Q20.
              除了18s RNA 外，還有哪些 internal control 可以選擇？
          1. 5.
            Western blot
              1. Q21.
                用甲醇活化PVDF的原理是什麼？
              2. Q22.
                Wash buffer: TBST內含Tween 20，它的作用是什麼？
              3. Q23.
                抽protein時RIPA+SDS的作用是？
              4. Q24.
                第二次做5a的IP壓不到band
              5. Q25.
                Western detect不到sema5a
              6. Q26.
                為什麼PAGE要分上下膠？
              7. Q27.
                PAGE可以拿來跑DNA、RNA嗎?
            1. 6.
              MTT assay
                1. Q28.
                  MTT assay的原理是？
                2. Q29.
                  除了MTT assay外還有哪些偵測cell proliferation的assay？
                3. Q30.
                  影響MTT數值偵測的關鍵因素是？
              1. 7.
                Wound Healing assay
                  1. Q31.
                    多可以拍到多久，也就是實驗可以進行多久？
                  2. Q32.
                    製造缺口的方式有？
                  3. Q33.
                    如何讓每次拍的位子都是一樣的？
                1. 8.
                  Luciferase reporter assay
                    1. Q34.
                      做Luciferase reporter assay用冷光儀使用注意事項為何?
                  1. 9.
                    primer設計
                      1. Q35.
                        為何qPCR primer產物長度不能太長?
                      2. Q36.
                        何為melting temperature?和Annealing temp的關係為何?
                      3. Q37.
                        何為Self complementarity、 Self 3' complementarity?
                      4. Q38.
                        何為primer dimer(引子二聚體)?
                      5. Q39.
                        Taqman的原理?為何產物可以設計長一點?
                      6. Q40.
                        在rtPCR，設計primer要靠近RNA的5'端還是3'端?原因?
                      7. Q41.
                        要怎麼測試pirmer的PCR條件? 若雜band太多或沒有產物要如何調整?
                      8. Q42.
                        何為OPC?
                    1. 10.
                      其他
                        1. Q43.
                          什麼是T.E buffer？
                        2. Q44.
                          驗證NGS (RNA seq)須注意事項?
                        Show all FAQ in the media Center (0)