Professor：aspirin
Date：2019-01-14
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  • 00:22 1.
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  • 00:58 2.
     Clone的由來
  • 01:42 3.
    clone本身運作所需的(backbone)
  • 04:51 4.
     MCS的原理
  • 02:09 5.
    clone本身運作所需的(backbone)
  • 00:50 6.
     MCS的原理
  • 00:08 7.
    -單切與雙切
  • 00:57 8.
     MCS的原理
  • 00:03 9.
    -單切與雙切
  • 02:09 10.
     MCS的原理
  • 03:04 11.
    -單切與雙切
  • 00:20 12.
     MCS的原理
  • 01:45 13.
    -單切與雙切
  • 00:02 14.
    -限制酶辨認序列特性
  • 00:03 15.
    -單切與雙切
  • 04:55 16.
    -限制酶辨認序列特性
  • 00:09 17.
    -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
  • 02:01 18.
    -限制酶辨認序列特性
  • 12:47 19.
    -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
  • 00:01 20.
    -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
  • 00:43 21.
    -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
  • 03:50 22.
    -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
  • 01:56 23.
     primer的設計
  • 00:01 24.
    -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
  • 00:10 25.
    -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
  • 00:00 26.
    -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
  • 02:19 27.
     primer的設計
  • 01:35 28.
    -insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
  • 00:00 29.
     primer的設計
  • 00:00 30.
    -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
  • 00:00 31.
    -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
  • 00:00 32.
    -限制酶辨認序列特性
  • 00:00 33.
    -單切與雙切
  • 00:00 34.
     MCS的原理
  • 00:14 35.
    clone本身運作所需的(backbone)
  • 00:00 36.
     MCS的原理
  • 00:00 37.
    -單切與雙切
  • 00:00 38.
    -限制酶辨認序列特性
  • 00:00 39.
    -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
  • 00:00 40.
    -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
  • 00:01 41.
     primer的設計
  • 00:02 42.
    -insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
  • 00:07 43.
    -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
  • 02:27 44.
    -insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
  • 01:37 45.
    -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
  • 00:00 46.
    Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
  • 00:02 47.
    -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
  • 00:00 48.
    Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
  • 00:02 49.
    -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
  • 01:43 50.
    Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
  • 04:40 51.
     質體的轉殖-轉殖控制組
  • 01:56 52.
    -QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
  • 00:01 53.
    -抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
  • 00:44 54.
    -QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
  • 00:01 55.
    -抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
  • 00:37 56.
    -QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
  • 01:09 57.
    -抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
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20190114專題報告-clone製作初級版108年_品豪
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       Clone的由來
    • 01:42 3.
      clone本身運作所需的(backbone)
    • 04:51 4.
       MCS的原理
    • 02:09 5.
      clone本身運作所需的(backbone)
    • 00:50 6.
       MCS的原理
    • 00:08 7.
      -單切與雙切
    • 00:57 8.
       MCS的原理
    • 00:03 9.
      -單切與雙切
    • 02:09 10.
       MCS的原理
    • 03:04 11.
      -單切與雙切
    • 00:20 12.
       MCS的原理
    • 01:45 13.
      -單切與雙切
    • 00:02 14.
      -限制酶辨認序列特性
    • 00:03 15.
      -單切與雙切
    • 04:55 16.
      -限制酶辨認序列特性
    • 00:09 17.
      -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
    • 02:01 18.
      -限制酶辨認序列特性
    • 12:47 19.
      -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
    • 00:01 20.
      -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
    • 00:43 21.
      -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
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    • 01:56 23.
       primer的設計
    • 00:01 24.
      -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
    • 00:10 25.
      -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
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    • 02:19 27.
       primer的設計
    • 01:35 28.
      -insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
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       primer的設計
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      -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
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      -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
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      -限制酶辨認序列特性
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    • 00:14 35.
      clone本身運作所需的(backbone)
    • 00:00 36.
       MCS的原理
    • 00:00 37.
      -單切與雙切
    • 00:00 38.
      -限制酶辨認序列特性
    • 00:00 39.
      -左右有別-一型二型-甲基干擾-鈍端與黏端-辨認序列長短-一黏二黏三四五黏
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      -目標序列的確認-目標序列的取得 --長的 ---已有序列P的 ---由cDNA P的 ---買的 --短的 ---annealing buffer (10 mM Tris pH 8.0, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA ) ---濃度 1 ~ 5 OD/100μl。等莫耳數混合。 ---94 ℃ 2 ~ 5 分鐘，然後慢慢冷卻到 25℃ ---T4PNK
    • 00:01 41.
       primer的設計
    • 00:02 42.
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    • 00:07 43.
      -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
    • 02:27 44.
      -insert與backbone濃度的比例-黏合的時間
    • 01:37 45.
      -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
    • 00:00 46.
      Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
    • 00:02 47.
      -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
    • 00:00 48.
      Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
    • 00:02 49.
      -微脂體(liposome)-電穿孔(electroporation)-反轉錄病毒(retrovirus)-農桿菌(agrobacterium)-基因槍(gene gun)、顯微注射(microinjection)
    • 01:43 50.
      Backbone給誰用----微脂體 -反轉錄病毒-電穿孔 -農桿菌-基因槍、顯微注射
    • 04:40 51.
       質體的轉殖-轉殖控制組
    • 01:56 52.
      -QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
    • 00:01 53.
      -抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
    • 00:44 54.
      -QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
    • 00:01 55.
      -抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
    • 00:37 56.
      -QPCR-WB-Function-抗菌斑測試-冷光測試
    • 01:09 57.
      -抗生素篩選-換轉殖方式-換轉殖系統-換轉殖條件 (濃度, 時間…)-換backbone-換細胞株
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    Author
    柯品豪
    Branch
    賴亮全教授
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    2019-01-14 10:33:08
    Last Updated
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